如何快速降低细胞间支原体污染水平？

当今，细胞培养技术广泛应用于科研、教学、临床试验研究、生物制品的研发和生产领域。大规模培养细胞是生物制药和疫苗生产领域中的一项基础工作，更是整个生产工艺过程中的中心环节，这项技术受多种因素的影响，如工作环境是否无菌、操作手法是否正确以及维持细胞所需的培养液等。

体外细胞的培养近乎苛刻，不但要求所使用的物品材料要洁净无菌，所有的操作过程也要在无菌的条件下进行，这也意味着细胞培养的过程中无时不刻受到微生物污染的威胁。细胞污染是细胞培养失败的关键诱因之一。在细胞体外培养过程中，最常见的污染源是支原体、细菌和霉菌污染，而其中支原体污染率竟高达30％～60％。

细菌和霉菌污染在显微镜下甚至是肉眼就很容易识别。细菌污染时,培养皿中的培养液变酸、变浑浊。在显微镜下,细胞间大量活跃运动的细小颗粒,细胞大量死亡。霉菌污染时, 严重时可见霉菌团块,漂浮在培养液中,显微镜下可见不同形态的霉菌菌丝。然而支原体污染的时候，初期比较难被识别出来。支原体的大小为 0.1~0.3μm,在普通的光学显微镜下不容易被观察到，并且可穿过绝大部分的滤膜，因其没有细胞壁，作用于细胞壁的抗生素对它无效

细胞培养皿一旦感染支原体后，通常不会有颜色变化。支原体附着在细胞株表面，通过抢夺细胞培养基中的养分实现增殖。在其繁殖的过程中除了消耗培养基中的各种养分，同时还会改变培养基中的pH值，甚至产生对细胞株有毒害的代谢产物，从而导致细胞状态的改变并影响其宿主细胞的生理、遗传等多方面的正常功能，用这些污染后貌似正常的细胞做试验或生产，将会严重影响结果。

预防细胞培养过程被支原体污染一直是个让人头疼的问题，保持无菌状态，无论对于新手抑或是老手，都是一个巨大的挑战。体外培养的细胞缺乏免疫系统，因此，控制污染的方式是预防污染！

上表中比较了几种常见去除支原体的方法。几种方法各有优劣，单独应用时均不够理想，实际应用中多是根据所污染支原体的种类，采用适宜的一种或几种去除支原体的方法相结合，以达到最终清除支原体的目的。

解决细胞间支原体污染，可以使用诺福支原体清除喷雾进行空间消毒，干雾灭菌方案构成:诺福支原体清除剂 + 比林科汉干雾过氧化氢灭菌设备。

比林科汉过氧化氢干雾灭菌器，自身符合洁净区净化要求，不带入任何外源污染，同时高效根除洁净室空间微生物，达到无菌净化的目标。先进的雾化技术，可将支原体去除剂进行雾化，雾化颗粒小于3微米，增效了空间扩散均匀性，迅速将消毒液弥漫充满整个密闭空间不放过每一处死角，高效去除支原体污染，灭菌效果堪称空前绝后，其均匀性、无残留很适合细胞房环境消毒及培养箱里面消毒，作用时间迅速，整个过程耗时短。

比林科汉过氧化氢消毒机配合诺福支原体清除剂可高效阻止真菌（和孢子），细菌（和孢子），支原体和病毒的生长和污染。不含汞，甲醛，苯酚或酒精，无毒，可生物降解，环保，对人员友好。